BÁO CÁO THỰC HÀNH TÁCH CHIẾT DNA TỪ GAN GÀ

1. Mục đích

Mục đích của bài thực hành là:

Quan sát và tìm hiểu quy trình cơ bản để tách chiết DNA từ tế bào động vật (gan gà) bằng các hóa chất và dụng cụ đơn giản, dễ tìm.

Thu hoạch DNA dưới dạng kết tủa, quan sát được bằng mắt thường.

2. Kết quả và Giải thích

Kết quả Thực hành

Sau khi thêm cồn ethanol lạnh vào dung dịch đã xử lý, một chất màu trắng, sợi, có dạng keo, bắt đầu kết tủa và nổi lên trên lớp cồn.

Quan sát trước và sau khi bổ sung ethanol:

Trước khi bổ sung ethanol: Dung dịch là hỗn hợp đồng nhất, có màu hơi vàng đục (từ dịch lọc gan gà và nước ép dứa).

Sau khi bổ sung ethanol: Xuất hiện một lớp chất lỏng không hòa tan với lớp nước bên dưới; tại ranh giới giữa hai lớp này, các sợi trắng đục (kết tủa DNA) dần dần xuất hiện và nổi lên.

Giải thích

Quá trình tách chiết DNA thành công nhờ các bước phá vỡ tế bào và phân lập DNA:

Nghiền gan gà và lọc: Bước này giúp phá vỡ mô và một phần tế bào, tạo ra dung dịch chứa các thành phần nội bào, bao gồm cả DNA.

Sử dụng nước rửa bát (dung dịch tẩy rửa): Giúp phá vỡ màng tế bào và màng nhân (cấu tạo từ lipid và protein) bằng cách hòa tan lipid, giải phóng DNA ra khỏi nhân.

Sử dụng nước ép dứa (bromelain/enzyme): Bromelain là một enzyme protease, giúp cắt nhỏ và loại bỏ protein (chủ yếu là histone bám quanh DNA), làm cho DNA được "tinh sạch" hơn và dễ dàng kết tủa.

Sử dụng cồn ethanol lạnh: DNA là một phân tử phân cực, tan tốt trong nước. Ethanol là một dung môi hữu cơ mà DNA không tan trong đó (không phân cực). Khi cho cồn ethanol lạnh vào, DNA sẽ bị mất nước và kết tủa lại. Cồn lạnh giúp tăng hiệu suất kết tủa.

3. Trả lời các câu hỏi

a. Tại sao phải sử dụng dung dịch tẩy rửa?

Sử dụng dung dịch tẩy rửa (như nước rửa bát pha loãng) có mục đích phá vỡ màng tế bào và màng nhân. Các màng này được cấu tạo chủ yếu từ lớp kép lipid và protein. Chất tẩy rửa có khả năng tương tác và hòa tan các lipid và protein này, giống như cách chúng làm sạch dầu mỡ, từ đó giúp giải phóng DNA đang được bao bọc bên trong nhân tế bào ra môi trường dung dịch.

b. Tại sao phải sử dụng nước dứa? Có thể thay thế bằng dung dịch gì?

Lý do sử dụng nước dứa: Nước ép dứa tươi chứa enzyme bromelain (một loại protease). Enzyme này có chức năng cắt nhỏ và loại bỏ các protein (như protein histone) đang liên kết chặt chẽ với DNA hoặc các protein khác còn sót lại trong dung dịch. Điều này giúp DNA trở nên "tinh sạch" hơn và dễ dàng kết tủa.

Có thể thay thế bằng: Bất kỳ dung dịch nào chứa enzyme protease (enzyme phân giải protein), ví dụ:

Muối ăn thịt (meat tenderizer): Thường chứa enzyme papain (từ đu đủ) hoặc bromelain.

Dung dịch chứa protease tinh khiết (như proteinase K trong phòng thí nghiệm).

c. Tại sao cần sử dụng cồn ethanol?

Cần sử dụng cồn ethanol (thường là cồn 90° trở lên và đã được làm lạnh) vì:

Gây kết tủa DNA: DNA là phân tử tan trong nước. Cồn ethanol là dung môi kém phân cực hơn nước. Khi thêm ethanol vào dung dịch nước có DNA, DNA sẽ không tan trong cồn. Ethanol sẽ lấy đi các phân tử nước xung quanh DNA, khiến các sợi DNA bị kéo lại với nhau và kết tủa thành chất rắn màu trắng đục có thể nhìn thấy được.

Tạo lớp tách biệt: Cồn có khối lượng riêng nhẹ hơn nước và không hòa tan với lớp dung dịch nước bên dưới, tạo ra một ranh giới rõ ràng. DNA kết tủa sẽ nổi lên và tập trung ở ranh giới này, giúp việc thu hoạch dễ dàng hơn.

d. Cần phải cải tiến, khắc phục điều gì để thu được kết quả tốt hơn?

Để tăng hiệu suất và độ tinh khiết của DNA thu được, có thể cải tiến các điểm sau:

Sử dụng cồn ethanol lạnh hơn: Cồn lạnh sẽ làm tăng hiệu suất kết tủa DNA. Nên để cồn trong tủ đông khoảng 30 phút trước khi sử dụng.

Khuấy trộn nhẹ nhàng hơn: Sau khi thêm cồn, cần đổ cồn dọc theo thành ống nghiệm một cách từ từ để tạo ra hai lớp phân cách rõ rệt và hạn chế khuấy trộn mạnh. Khuấy mạnh có thể làm gãy sợi DNA và làm DNA bị phân tán, khó kết tủa thành một khối rõ ràng.

Lọc dung dịch kỹ hơn: Sử dụng vải mùng hoặc giấy lọc mịn hơn để loại bỏ hết các mảnh mô và tế bào lớn, giúp dung dịch ban đầu trong hơn.

Tăng thời gian ủ enzyme: Cho dung dịch nghỉ lâu hơn (khoảng 15-20 phút) sau khi thêm nước dứa để enzyme protease có thêm thời gian phân giải protein triệt để.

Tăng lượng mẫu hoặc sử dụng cồn tinh khiết hơn: Sử dụng cồn tuyệt đối (96% - 100%) sẽ cho kết tủa DNA sắc nét hơn.

1.Mục đích: tách chiết được DNA từ các mẫu vật sống

2.Kết quả và giải thích: Sau thực hiện quy trình thí nghiệm, thấy xuất hiện búi kết tủa trắng đục chứa DNA nằm lơ lửng trong lớp cồn

3.

a, Sử dụng dung dịch tẩy rửa để phá vỡ màng tế bào và làm biến tính protein, loại bỏ tạp chất là protein và lipid,..

b, - Nước dứa có chứa enzyme bromelain, một enzyme protease có khả năng phân cắt protein. Protein là thành phần cấu tạo nên màng tế bào và nhân tế bào, do đó bromelain có thể giúp phá vỡ các màng này và giải phóng DNA ra khỏi tế bào.

- Có thể thay thế nước dứa bằng nước thịt hoặc nước đu đủ.

c, Dùng cồn ethanol để kết tủa dna và loại bỏ tạp chất.

d, - Thực hiện thao tác tách chiết DNA cẩn thận và chính xác theo hướng dẫn.

- Tránh làm hỏng DNA trong quá trình thao tác

câu 1 : Trình bày vai trò của thực vật . các biện pháp bảo vệ sự đa dạng của thục vật

Câu 2 : trình bày vai trò của vi khuẩn trong thiên nhiên, trong nông nghiệp ? lấy ví dụ vai trò của vi khuẩn trong noog nghiệp và công nghiệp

Câu 3 : Kể tên các đại diện của nghành sau : Nghành Tảo , ngành rêu , ngành dương xỉ , ngành hạt trần và ngành hạt kín.

câu 4 :Nhận xét; Số luongj thực vật hạt kín đối với các ngành khác; số luongj cây trồng so với cây hoang dại ? Nấm và địa y có phải thực vật không ??????

I.       MỘT SỐ CÂU HỎI

    Câu 1: Phân biệt các nhóm, ngành thực vật? Lấy ví dụ?

    Câu 2: Nêu vai trò của thực vật đối với môi trường, đối với động vật và con người?   

    Câu 3: Sự đa dạng của động vật được thể hiện như thế nào? Lấy ví dụ minh họa sự đa dạng của động vật?  

    Câu 4: Kể tên và nêu đặc điểm của các nhóm động vật? Lấy ví dụ cho từng nhóm?

    Câu 5: Nêu vai trò của động vật đối với tự nhiên và con người.

CÂU 1. Kể tên một số virus gây bệnh ở thực vật và gây bệnh ở
người.Cho ví dụ về triệu chứng bệnh của 3 loại virut gây bệnh ở người.
CÂU 2. Kể một số biện pháp phòng chống bệnh do virut và vi khuẩn gây
nên.
Câu 3. Em đã được tiêm những loại vaccine nào?
Khi sử dụng thuốc kháng sinh để điều trị bệnh ở người chúng ta cần lưu
ý điều gì?

1. Mục đích : Tách chiết được DNA từ mẫu vật sống

2. Kết quả : Xuất hiện kết tủa trắng đục chứa DNA

3.a. Dung dịch tẩy rửa (chất tẩy rửa) có tác dụng phá vỡ màng tế bào và màng nhân, giúp giải phóng DNA ra khỏi tế bào. Chất tẩy rửa làm biến tính các protein, bao gồm cả các enzyme nuclease có thể phân hủy DNA, loại bỏ tạp chất là protein và lipid…

b. Nước dứa chứa enzyme bromelain, có tác dụng cắt các protein histon liên kết với DNA, giúp DNA tách ra khỏi phức hợp protein và dễ dàng kết tủa hơn. Có thể thay thế nước dứa bằng các dung dịch chứa enzyme phân giải protein khác như dung dịch chiết xuất từ đu đủ xanh hoặc dung dịch enzyme trypsin. 

c. DNA không tan trong cồn ethanol. Khi cho cồn ethanol lạnh vào dung dịch chứa DNA, DNA sẽ kết tủa và nổi lên trên, có thể dễ dàng quan sát và thu hoạch. 

d. Cần phải sử dụng cồn ethanol lạnh để tăng hiệu quả kết tủa DNA. Nghiền mẫu vật thật kĩ để phá vỡ tối đa thành tế bào, giúp giải phóng DNA nhiều hơn. Lọc mẫu cẩn thận để loại bỏ các mảnh tế bào lớn, tránh tạp chất lẫn vào DNA. Sử dụng các dung dịch có nồng độ và pH phù hợp để tối ưu hóa quá trình tách chiết.

1.thế nào là hành vi sức khỏe lành mạnh và không lành mạnh,cho ví dụ và giải thích.

2.muốn cơ thể khỏe mạnh thì ta thực hện các biện pháp nào? mỗi biện pháp phải giải thích cụ thể.

3.thế nào là quần thể sinh vật ? cho ví dụ ? giải thích một số tác động của ánh sán,  nhiệt độ, độ ẩm lên đời sống của sinh vật.

4.hãy kể một số tai nạn thương tích gặp trong cuộc sống hàng ngày. muốn phòng chống tai nan thương tích, ta thực hiện những nguyên tắc nào?

5.hãy nêu nguyên nhân, hậu quả, cách phòng chống và điều trị tất khúc xạ cận thị.